Морфофункциональные изменения эритроцитов при хранении в растворе PAGGSM

Аннотация

Актуальность. Эритроцитарные компоненты донорской крови являются одними из наиболее востребованных препаратов в клинической практике и применяются у пациентов с анемиями, онкогематологическими заболеваниями, массивной кровопотерей, травмами и другими состояниями, сопровождающимися тканевой гипоксией. В связи с этим качество эритроцитного компонента и сохранность его функциональных свойств имеют принципиальное значение для эффективности и безопасности гемотрансфузии. Эффективность гемотрансфузии напрямую зависит от сохранности морфофункциональных свойств эритроцитов в процессе хранения. По мере увеличения срока хранения в эритроцитах развиваются метаболические, мембранные и механические изменения, способные снижать их функциональную полноценность. Применяемые в настоящее время добавочные растворы, например SAGM, позволяют замедлить развитие повреждений, однако на поздних сроках не обеспечивают полного предотвращения деструктивных изменений. Добавочный раствор PAGGSM продлевает срок хранения эритроцитов до 49 дней, обеспечивая низкий уровень гемолиза. Однако влияние данного раствора на структурно-функциональные свойства эритроцитов остаются неизученными.
Цель. Комплексная оценка морфофункциональных свойств эритроцитов при 49-дневном хранении в растворе PAGGSM методом атомно-силовой микроскопии и биохимического анализа.
Материалы и Методы. Исследовали эритроцитную взвесь (ЭВ) от 4 доноров, которая хранилась в течение 49 дней при +4°C. Оценку морфофункциональных характеристик эритроцитов (наноструктуры и модуля Юнга), а также ряда гематологических показателей проводили в контрольные сроки хранения: на 1, 29 и 49 дни, выбранные как реперные точки, соответствующие началу, середине и окончанию периода хранения. В работе были использованы гематологические анализаторы ABL800 Basic и Sysmex XN-350 для оценки биохимических показателей и для определения параметров гемограммы. Для исследования морфофункциональных свойств использовали атомно-силовые микроскопы NTEGRA Prima и NTEGRA BIO. Процентное содержание производных гемоглобина оценивали на спектрофотометре Unico 2800.
Результаты. По мере хранения регистрировались характерные метаболические изменения такие как прогрессирующее закисление среды, истощение глюкозы и изменение электролитного баланса. Гематологические показатели оставались стабильными, уровень гемолиза не превышал нормативных значений (<0,8%). Однако с помощью АСМ были выявлены морфофункциональные изменения: доля дискоцитов снизилась с 93% до 40% к 49 дню хранения, при этом возросло количество эхиноцитов и микросфероцитов. Модуль Юнга увеличился в 2 раза и составил 11,1 кПа к 49 дню хранения. Параметры наноструктуры (h₁ и L₁) достоверно выросли. Процентное содержание компонентов гемоглобина оставались стабильными на протяжении всего периода хранения.
Заключение. Раствор PAGGSM поддерживает целостность мембраны и низкий гемолиз до 49 дней, однако не предотвращает развитие повреждений при хранении, а сдвигает их возникновение на более поздние сроки по сравнению со стандартным раствором SAGM, при этом характер изменений остаётся схожим. К 49 дню хранения накапливаются критические морфофункциональные изменения эритроцитов. Это свидетельствует, что целостность мембраны и отсутствие гемолиза не гарантируют функциональную сохранность клеток и эффективность трансфузии.