Получение рекомбинантного белка S100B в аналитических и препаративных количествах с использованием векторной системы pBT7-N-His и первые этапы его структурно-функциональных исследований

  • O. L. Terekhina Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт общей патологии и патофизиологии», Москва, Россия
  • M. K. Nurbekov Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт общей патологии и патофизиологии», Москва, Россия
  • O. P. Dmitrenko Государственное бюджетное учреждение здравоохранения «Московский городской научно-практический центр борьбы с туберкулезом Департамента здравоохранения города Москвы», Москва, Россия
  • D. M. Davidov Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт общей патологии и патофизиологии», Москва, Россия
Ключевые слова: гетерологичная экспрессия кДНК, рекомбинантный белок S100B, векторная система pBT7-N-His, рекомбинантная плазмида, оптимизация гетерологичной экспрессии, аналитическая и препаративная экспрессия белков, фолдинг белка, металл-аффинная хроматография белков

Аннотация

С целью исследований структуры и функций белка S100B в клетке и в тканях был проведен цикл работ по оптимизации экспрессии рекомбинантного белка (рекS100B) в E. coli. Проведены процедуры аналитической экспрессии рекS100B в составе рекомбинантной плазмиды pBT7-N-His-S100B03. При SDS-ПААГЭ лизатов клонов бактерий выявлена четко экспрессирующаяся полоса в 10 кДа, которая была идентифицирована как мономерная форма белка. Перспективы исследований рекS100B связаны с потенциальным его использованием для изучения тонких молекулярных механизмов PPI взаимодействий в системе S100B/RAGE рецептор как ключевого звена передачи сигналов в клетке и организме и в качестве перспективного объекта создания диагностических систем мониторинга состояний организма в норме и при патологии связанной с нарушениями регуляции гена и/или функций S100B белка.

Опубликован
2018-12-11
Раздел
Краткие сообщения