Экспрессия Toll-подобных рецепторов TLR2 и TLR4 типа на иммунных клетках и продукция про- и противовоспалительных цитокинов в трансгенной модели болезни Паркинсона у мышей

G. V. Idova; E. I. Alperina; S. Ya. Zhanaeva; M. A. Tikhonova; M. M. Gevorgyan

doi:10.25557/2310-0435.2022.03.38-43

G. V. Idova Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт нейронаук и медицины», Новосибирск, Россия http://orcid.org/0000-0002-9090-514X
E. I. Alperina Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт нейронаук и медицины», Новосибирск, Россия
S. Ya. Zhanaeva Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт нейронаук и медицины», Новосибирск, Россия http://orcid.org/0000-0002-4798-054X
M. A. Tikhonova Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт нейронаук и медицины», Новосибирск, Россия http://orcid.org/0000-0002-4265-8981
M. M. Gevorgyan Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт нейронаук и медицины», Новосибирск, Россия

DOI: https://doi.org/10.25557/2310-0435.2022.03.38-43

Ключевые слова: болезнь Паркинсона, трансгенные А53Т мыши, моноциты, T- и B-субпопуляции клеток, Toll-подобные рецепторы 2 и 4, провоспалительные и противовоспалительные цитокины

Аннотация

Современные исследования свидетельствуют, что иммунно-воспалительные нарушения лежат в основе патогенеза болезни Паркинсона (БП), прогрессирующего нейродегенеративного заболевания, характеризующегося гибелью дофаминовых нейронов и накоплением агрегированного α-синуклеина. В настоящее время отсутствуют данные об этих процессах на ранних доклинических стадиях развития БП. Цель исследования – анализ экспрессии TLR2 и TLR4 на циркулирующих моноцитах, Т- и В-клетках, а также периферической продукции провоспалительных (IFNγ, IL-6, IL-17А) и противовоспалительных (IL-4 и IL-10) цитокинов у молодых трансгенных мышей A53T по сравнению с контрольными (WT) мышами.

Материалы и методы: Экспериментальной моделью БП служили мыши-самцы линии B6.CG-Tg(Prnp-SNCA*A53T)23MKle/J (A53T, 2,0–2,5 месяца), экспрессирующие мутацию А53Т человеческого α-синуклеина. Двигательную активность анализировали в тесте «открытое поле», используя автоматическую систему регистрации Noldus (Noldus Information Technology, Нидерланды). Координацию и баланс оценивали на аппаратно-программном комплексе «Ротарод» (ООО «Нейроботикс Трейдинг», Москва) при разной скорости вращения барабана. Уровень моноцитов, Т- и В-лимфоцитов и их субпопуляций в периферической крови, а также экспрессию TLR2 и TLR4 на этих клетках анализировали на проточном цитофлюориметре FACSCanto II (BD). Спонтанную и индуцированную митогенами продукцию провоспалительных (IFN, IL-6, IL-17А) и противовоспалительных (IL-4 и IL-10) цитокинов в культуральном супернатанте мононуклеарных клеток (МНК) крови измеряли на мультиплексном анализаторе белков и нуклеиновых кислот (Milliplex Luminex 200, Merk Millipore).

Результаты. У молодых трансгенных А53Т мышей не обнаружены признаки нарушения моторной функции, но выявлено повышение циркулирующих CD115⁺CD11b⁺моноцитов, CD3⁺ Т клеток, CD3⁺CD4⁺ T xелперов (Тh), а также снижение содержания CD3⁺CD4⁺CD25⁺ Т регуляторных (Тreg) клеток по сравнению с контрольными WT мышами. Экспрессия TLR2 и TLR4 была повышена у таких животных только на Тreg клетках и имелась тенденция к увеличению TLR4 на моноцитах. Показано повышение спонтанной продукции провоспалительного цитокина IL-6 на фоне снижения спонтанной и стимулированной продукции противовоспалительного цитокина IL-10. Продукция IFNγ, IL-17 и IL-4 у А53Т мышей мало отличалась от WT мышей.

Заключение. У мышей А53Т с гиперэкспрессией α-синуклеина на ранней стадии паркинсонизма до проявления моторных нарушений наблюдаются изменения иммунных показателей, указывающие на развитие воспаления.