Выбор эффективного аффинного сорбента для выделения белков, обладающих сиалидазной активностью, из сыворотки крови человека
Аннотация
Целью исследования было определить эффективный аффинный сорбент для выделения белков, обладающих сиалидазной активностью, из сыворотки крови человека.
Материалы и методы. Для получения белков, обладающих сиалидазной активностью, было использовано четыре аффинных сорбента: 1) иммобилизованная на агарозе трисиаловая кислота Neu5Ac(α2-8)Neu5Ac(α2-8)Neu5Ac, 2) иммобилизованный на агарозе дериват сиаловой кислоты (Neu5Acα)3-C3-PAA-biot, 3) иммобилизованный на агарозе дериват сиаловой кислоты 5-amino-Neu2en, 4) иммобилизованный на агарозе дериват сиаловой кислоты 4-amino-Neu5Ac2en. Выделение белков, ответственных за десиалирование липопротеидов низкой плотности (ЛНП), проводили с помощью электрофореза в градиентном полиакриламидном геле.
Результаты. Показано, что наиболее эффективно связывает белки, обладающие нейраминидазной активностью, сорбент с (Neu5Acα)3-C3-PAA-biot. При проведении электрофореза полученных элюатов выделяются белки с молекулярной массой 65 и 116 кДа.