Влияние ингибирования поли (АДФ-рибозо) полимеразы-1 на уровень внутриклеточного кальция, АТФ и выживаемость культивируемых нейронов мозжечка крысы при гиперстимуляции глутаматных рецепторов

  • E. G. Sorokina Федеральное государственное автономное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр здоровья детей» Министерства здравоохранения Российской Федерации, Москва, россия
  • M. A. Chernenko Федеральное государственное автономное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр здоровья детей» Министерства здравоохранения Российской Федерации, Москва, россия
  • I. A. Krasilnikova Федеральное государственное автономное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр здоровья детей» Министерства здравоохранения Российской Федерации, Москва, россия
  • V. P. Reutov Федеральное государственное бюджетное учреждение науки «Институт высшей нервной деятельности и нейрофизиологии» Российской академии наук, Москва, Россия
  • V. G. Pinelis Федеральное государственное автономное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр здоровья детей» Министерства здравоохранения Российской Федерации, Москва, россия http://orcid.org/0000-0001-8579-605X
  • A. M. Surin Федеральное государственное автономное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр здоровья детей» Министерства здравоохранения Российской Федерации, Москва, Россия; Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт общей патологии и патофизиологии», Москва, Россия http://orcid.org/0000-0003-1104-5442
Ключевые слова: нейроны мозжечка, рецепторы глутамата, PARP-1, кальций, АТФ, ингибиторы, NO-синтаза

Аннотация

Актуальность. Изучение механизмов действия ингибиторов ядерного фермента поли (АТФ-рибозо) полимеразы-1 (PARP-1) на динамику изменения внутриклеточной концентрации Ca2+ ([Ca2+]i), содержание АТФ в нейронах и их выживаемость при избыточной стимуляции глутаматных рецепторов способствует пониманию биохимических процессов при инсультах мозга и подбору препаратов для терапии последствий. Цель. Определить изменения [Ca2+]i, концентрации ATФ ([ATФ]) и выживаемости клеток при одновременном действии токсических концентраций глутамата (Glu) и ингибиторов PARP-1, и выяснить возможность участия нейрональной NO-синтазы (nNOS) в активации PARP-1. Методы и материалы. Исследование выполнено с использованием 7-8 дневных первичных культур нейронов мозжечка крысы. Изменения [Ca2+]i определяли методом флуоресцентной микроскопии с помощью Fura-FF. Cодержание [АТФ] измеряли с использованием люциферин-люциферазной биолюминесценции. Выживаемость нейронов оценивали с помощью МТТ-теста по восстановлению соли тетразолия до формазана. Активность PARP-1 и nNOS контролировали с помощью ингибиторов. Результаты. Показано, что ингибиторы PARP-1 миноциклин (0,2 мкМ) и бензамид 1 мМ) отдаляют наступление индуцированной глутаматом отсроченной кальциевой дизрегуляции, уменьшают понижение внутриклеточной [АТФ] и увеличивают выживаемость культивируемых нейронов. Ингибитор nNOS 7-нитроиндазол (100мкМ) оказывал на [ATФ] и выживаемость нейронов эффекты, аналогичные ингибиторам PARP-1. Выводы. Положительныое действие ингибиторов PARP-1 и nNOS на выживаемость клеток, подвергнутых токсическому действию Glu, обусловлено, вероятно, тем, что ингибиторы поддерживают более высокую [ATФ] во время и после прекращения воздействия Glu, позволяя большей доле нейронов в культуре восстановить ионный гомеостаз.

Опубликован
2018-12-11
Как цитировать
Sorokina, E., Chernenko, M., Krasilnikova, I., Reutov, V., Pinelis, V., & Surin, A. (2018, декабрь 11). Влияние ингибирования поли (АДФ-рибозо) полимеразы-1 на уровень внутриклеточного кальция, АТФ и выживаемость культивируемых нейронов мозжечка крысы при гиперстимуляции глутаматных рецепторов. Патогенез, 16(4), 168-173. https://doi.org/https://doi.org/10.25557/2310-0435.2018.04.168-173
Раздел
Краткие сообщения