Влияние ингибирования поли (АДФ-рибозо) полимеразы-1 на уровень внутриклеточного кальция, АТФ и выживаемость культивируемых нейронов мозжечка крысы при гиперстимуляции глутаматных рецепторов

E. G. Sorokina; M. A. Chernenko; I. A. Krasilnikova; V. P. Reutov; V. G. Pinelis; A. M. Surin

doi:10.25557/2310-0435.2018.04.168-173

E. G. Sorokina Федеральное государственное автономное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр здоровья детей» Министерства здравоохранения Российской Федерации, Москва, россия
M. A. Chernenko Федеральное государственное автономное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр здоровья детей» Министерства здравоохранения Российской Федерации, Москва, россия
I. A. Krasilnikova Федеральное государственное автономное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр здоровья детей» Министерства здравоохранения Российской Федерации, Москва, россия
V. P. Reutov Федеральное государственное бюджетное учреждение науки «Институт высшей нервной деятельности и нейрофизиологии» Российской академии наук, Москва, Россия
V. G. Pinelis Федеральное государственное автономное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр здоровья детей» Министерства здравоохранения Российской Федерации, Москва, россия http://orcid.org/0000-0001-8579-605X
A. M. Surin Федеральное государственное автономное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр здоровья детей» Министерства здравоохранения Российской Федерации, Москва, Россия; Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт общей патологии и патофизиологии», Москва, Россия http://orcid.org/0000-0003-1104-5442

DOI: https://doi.org/10.25557/2310-0435.2018.04.168-173

Ключевые слова: нейроны мозжечка, рецепторы глутамата, PARP-1, кальций, АТФ, ингибиторы, NO-синтаза

Аннотация

Актуальность. Изучение механизмов действия ингибиторов ядерного фермента поли (АТФ-рибозо) полимеразы-1 (PARP-1) на динамику изменения внутриклеточной концентрации Ca²⁺ ([Ca²⁺]i), содержание АТФ в нейронах и их выживаемость при избыточной стимуляции глутаматных рецепторов способствует пониманию биохимических процессов при инсультах мозга и подбору препаратов для терапии последствий. Цель. Определить изменения [Ca²⁺]i, концентрации ATФ ([ATФ]) и выживаемости клеток при одновременном действии токсических концентраций глутамата (Glu) и ингибиторов PARP-1, и выяснить возможность участия нейрональной NO-синтазы (nNOS) в активации PARP-1. Методы и материалы. Исследование выполнено с использованием 7-8 дневных первичных культур нейронов мозжечка крысы. Изменения [Ca2+]i определяли методом флуоресцентной микроскопии с помощью Fura-FF. Cодержание [АТФ] измеряли с использованием люциферин-люциферазной биолюминесценции. Выживаемость нейронов оценивали с помощью МТТ-теста по восстановлению соли тетразолия до формазана. Активность PARP-1 и nNOS контролировали с помощью ингибиторов. Результаты. Показано, что ингибиторы PARP-1 миноциклин (0,2 мкМ) и бензамид 1 мМ) отдаляют наступление индуцированной глутаматом отсроченной кальциевой дизрегуляции, уменьшают понижение внутриклеточной [АТФ] и увеличивают выживаемость культивируемых нейронов. Ингибитор nNOS 7-нитроиндазол (100мкМ) оказывал на [ATФ] и выживаемость нейронов эффекты, аналогичные ингибиторам PARP-1. Выводы. Положительныое действие ингибиторов PARP-1 и nNOS на выживаемость клеток, подвергнутых токсическому действию Glu, обусловлено, вероятно, тем, что ингибиторы поддерживают более высокую [ATФ] во время и после прекращения воздействия Glu, позволяя большей доле нейронов в культуре восстановить ионный гомеостаз.

Аннотация

Наиболее читаемые статьи этого автора (авторов)